Estado mutacional de BRAF y parámetros histopatológicos en melanoma maligno cutáneo / Mutational status of BRAF and histopathological characteristics in cutaneous malignant melanoma

El melanoma maligno es la forma más agresiva de cáncer de piel, con una tasa de mortalidad en Argentina 1997-2001 = 1.1/100 000 en varones y 0.6 en mujeres. El proto-oncogén BRAF es foco de intensa investigación, su mutación es uno de los principales promotores tumorales y pueden presentarse en 50% de los melanomas. Se han aprobado varios fármacos con actividad clínica sobre las mutaciones BRAF. El objetivo del trabajo es evaluar el estado mutacional de BRAF (exón 15) en biopsias con melanoma maligno cutáneo y su relación con las características histopatológicas. Realizamos un estudio observacional, retrospectivo, de muestras fijadas en formol e incluidas en parafina. Revisamos edad, sexo, diagnóstico y datos histopatológicos, tamaño y porcentaje tumoral, viabilidad para análisis molecular y presencia de melanina. Evaluamos mutaciones de BRAF con PCR/secuenciación Sanger. Utilizamos test de Student, Chi cuadrado, Wilcoxon y prueba exacta de Fisher. De 49 casos se pudo purificar y secuenciar el 76% (38/49), 13/38 (34%) mujeres y 25/38 (66%) varones, edad mediana 70 años. Localización más frecuente: tórax con 14/35 (40%). Tipo histológico: extensivo superficial 18/38 (47%). Niveles de Clark, 11/38 (29%): I-II y 27/38 (71%): III, IV y V. Mediana del Breslow: 1.6 mm. Fase de crecimiento radial 11/38 (29%) y 27/38 (71%) vertical. Presentaron mutaciones 16/38 (42%). Como lo informado por otros autores, no se encontró asociación entre el estado mutacional del exón 15 y los parámetros clínicos o histopatológicos.

Malignant melanoma (MM) is the more aggressive form of skin cancer with a mortality rate in Argentina 1997-2001 = 1.1/100 000 in men and 0.6 in women. BRAF proto-oncogene is focus of intense research; its mutation is one of the main tumor promoters and occurs in approximately 50% of MM. Several drugs with clinical activity on BRAF mutations have been approved. The aim of the study is to evaluate the mutational status of BRAF (exon 15) in cutaneous MM biopsies and its relationship with histopathological characteristics. We carried out an observational, retrospective study of samples fixed in formaldehyde and paraffin embedded; reviewing age, sex, diagnosis, histopathological data, tumor size and percentage, viability for molecular analysis and melanin presence. We evaluated BRAF mutations with PCR/Sanger sequencing. For statistics we used Student's t test, Chi square, Wilcoxon and Fisher's exact test. We were able to purify and sequence 76% (38/49) samples, 13/38 (34%) from women and 25/38 (66%) from men, the median age being 70 years. Most frequent location: thorax 14/35 (40%). Histological type: Superficial spreading 18/38 (47%). Clark´s levels, 11/38 (29%): I-II and 27/38 (71%): III, IV and V. Breslow´s median: 1.6 mm. Radial growth phase 11/38 (29%) and 27/38 (71%) vertical. Presented mutations 16/38 (42%). As reported by other authors, no association was found between the mutational state of exon 15 and clinical or histopathological parameters.

Distribution of molecular subtypes of advanced lung adenocarcinoma and clinical outcomes in a center of Argentina

The prevalence of relevant oncogenic drivers in lung adenocarcinoma varies in our region and data on clinical outcomes is scarce. The objective of the study was to describe the prevalence of KRAS, BRAF and EGFR mutations and ALK translocations in patients with advanced lung adenocarcinoma, and to depict the clinical outcome according to treatment strategies. Patients with adequate tumor biopsy sampling were included. KRAS, BRAF and EGFR mutations were studied by Sanger sequencing. ALK translocations were studied by fluorescent in situ hybridization (FISH) and immunohistochemistry (IH) with antibodies against ALK with clones D5F3 and 5A4. Informed consent was signed by 118 patients and 84 (72%) with complete molecular analysis were included. KRAS mutations were detected in 16 samples (19%), EGFR in 11 (13%), 9 of them conferring sensitivity to EGFR inhibitors, and BRAF mutations in 1 (1%). ALK translocations were detected in 3 samples (4%). Median follow-up was 42.4 [interquartile range (IQR): 27.0-64.2] months. Globally, median overall survival was 10.3 [IQR: 5.6-20.2] months. Median survival was 10.8 [IQR: 6.0-20.3] months in the group of patients without detectable molecular alteration, 9.6 [IQR: 3.7-16.1] months in KRAS mutant population (HR: 1.08; p = 0.82) and 32.5 [IQR: 19.6-38.4] months in patients with ALK translocations or sensitizing EGFR mutated tumors treated with tyrosine kinase inhibitors (HR: 0.27; p = 0.03). In conclusion, the prevalence of molecular alterations and outcomes in our population is similar to that reported in other studies in Western countries.

La prevalencia de alteraciones en oncogenes en adenocarcinoma de pulmón varía en nuestra región. El objetivo fue describir la prevalencia de mutaciones en KRAS, BRAF y EGFR y las translocaciones de ALK en pacientes con adenocarcinoma de pulmón y estudiar la supervivencia de acuerdo a subtipos moleculares. Se incluyeron pacientes con biopsias adecuadas para el estudio. Se evaluó el estado mutacional de KRAS, BRAF y EGFR por secuenciación con la técnica de Sanger. Las translocaciones de ALK se estudiaron por hibridación in situ por fluorescencia (FISH) e inmunohistoquimica (IHQ) contra ALK (clones D5F3 y 5A4). De 118 pacientes evaluados, se incluyeron 84 (72%) con análisis molecular completo. Se detectaron mutaciones de KRAS en 16 muestras (19%), EGFR en 11 (13%), y BRAF en 1 muestra (1%). Se detectaron rearreglos de ALK en 3 muestras (4%). La mediana de seguimiento de los pacientes fue de 42.4 [rango intercuatilo (RIC): 27.0-64.2] meses. Globalmente, la mediana de supervivencia en la población fue 10.3 [RIC: 5.6-20.2] meses y fue de 10.8 [RIC: 6.0 20.3] meses en pacientes sin alteraciones moleculares detectables. La mediana de supervivencia de los pacientes con mutación en KRAS fue de 9.6 [RIC: 3.7-16.1] meses (HR: 1.08; p = 0.82) y 32.5 [RIC: 19.6-38.4] meses en el grupo con rearreglos de ALK o mutaciones en EGFR tratados con inhibidores de tirosina quinasa (HR: 0.27; p = 0.03). En conclusión, la prevalencia de alteraciones moleculares en nuestra población fue similar a otros países occidentales.

Lesiones por virus de papiloma humano de la vía aerodigestiva superior, incidencia de subtipos / Human papilloma virus related lesions of the upper aerodigestive tract, incidence of subtypes / Lesões por vírus do papiloma humano do trato aerodigestivo superior - Incidência de subtipos

Antecedentes: el cáncer de la vía aerodigestiva superior (CVADS), al que con frecuencia se lo engloba como “cáncer de cabeza y cuello”, tiene una incidencia aproximada de 30 nuevos casos cada 100.000 habitantes por año, habiendo presentado un aumento significativo en la última década. Los principales factores de riesgo para el CVADS siguen siendo la exposición al tabaco y el alcohol, pero el virus del papiloma humano (VPH) se ha encontrado asociado en la etiología del 20 al 25% de los CVADS, principalmente los ubicados en la región de la orofaringe. El virus tiene dos oncoproteínas, E6 y E7. E6 tiene la propiedad de unirse a la proteína celular p53, que regula la transcripción de la p21 e inhibe las quinasas ciclindependientes, las cuales son esenciales para la progresión del ciclo celular a la fase S, haciendo que la célula se replique descontroladamente...

Background: cancer of the upper aerodigestive tract (cuadt) that often encompasses it as “cancer of the head and neck, has an incidence of 30 new cases per 100,000 population per year, having presented a significant increase in the last decade. The main risk factors for CUADT remain exposure to tabaco and alcohol, but the human papillomavirus (HPV) has been found associated in the etiology of 20 to 25% of CUADT, mainly those located in the region oropharynx. The virus has two oncoproteins E6 and E7. E6 has the property of binding to cellular p53 protein that regulates transcription of p21, which inhibits cyclin dependent-kinases which are essential for cell cycle progression to S phase causing the cell to replicate uncontrollably...

Antecedentes: o câncer do trato aerodigestivo superior, que é frequentemente englobado no “câncer de cabeça e pescoço”, tem uma incidência aproximada de 30 casos novos cada 100.000 habitantes por ano, com um incremento significativo na última dé- cada. Os principais fatores de risco para o câncer de cabeça e de pescoço continuam sendo a exposição ao tabaco e ao álcool, mas o vírus do papiloma humano (VPH) é associado na etiologia de 20% até 25% dos casos de câncer do trato aerodigestivo superior, principalmente nos localizados na região da orofaringe. O vírus contém duas oncoproteínas E6 e E7. A E6 tem a propriedade de se unir à proteí- na celular p53, a qual regula a transcrição da p21, a qual inibe as quinases dependentes de ciclina que são essenciais para a progressão do ciclo celular à fase S, fazendo com que a célula se replique descontroladamente...

Caracteres clínico-patológicos y perfil genético en el carcinoma colorrectal / Clinical-pathological features and gene profile in colorectal cancer

El cáncer colorrectal es el tercer cáncer más frecuente en hombres y el segundo más frecuente en mujeres, con una incidencia mundial aproximada de 1.2 millones de casos nuevos por año. Nuestro objetivo primario fue estudiar la relación existente entre las características clínico-histológicas en individuos con cáncer colorrectal y el estado mutacional de los codones 12 y 13 del gen KRAS (7 mutaciones validadas), con el fin de hallar un marcador histopatológico para los tumores mutados. El objetivo secundario fue determinar cuántos pacientes tenían mutaciones adicionales en los codones 15 y 61 del gen KRAS y 600 del gen BRAF que podrían modificar el fenotipo tumoral. Fueron seleccionados 60 individuos con cáncer colorrectal (30 wild-type y 30 con mutaciones validadas en los codones 12 y 13 del gen KRAS). Se amplificaron y secuenciaron del gen KRAS los exones 2 y 3, y del gen BRAF el exón 15. La información recolectada se examinó mediante un análisis descriptivo, análisis univariado y/o análisis multivariado, según correspondiese. En conclusión, no se encontró relación entre las características clínico-histológicas de los tumores de individuos con diagnóstico de cáncer colorrectal y el estado mutacional de los codones 12 y 13 del gen KRAS. No hallamos un marcador histopatológico para los tumores mutados. En pacientes con adenocarcinomas colorrectales avanzados y KRAS wild-type resulta de interés considerar el estudio del codón 600 del gen BRAF.

Colorectal cancer is the third most frequent cancer in men and the second most frequent in women, with a worldwide incidence of approximately 1.2 million new cases per year. Our primary objective was to study the relationship between clinical and histological features of individuals with colorectal cancer and the mutational status of codons 12 and 13 of the KRAS gene (7 validated mutations), in order to find a histopathological marker to mutated tumors. The secondary objective was to determine how many patients had additional mutations in codons 15 and 61 of the KRAS gene, and codon 600 of the BRAF gene, which could modify the tumor phenotype. Sixty individuals with colorectal cancer (30 wild-type subjects and 30 with validated mutations in codons 12 and 13 of the KRAS gene) were selected. Exons 2 and 3 of the KRAS gene, and exon 15 of the BRAF gene were amplified and sequenced. The data collected were reviewed by a descriptive, univariate and/or multivariate analysis, as appropriate. In conclusion, no relation was found between clinical and histological features of individuals with colorectal cancer and their mutational status for codons 12 and 13 of the KRAS gene. This suggests that those easily available data do not allow predicting the response to anti-EGFR therapy. In patients with advanced colorectal adenocarcinomas and KRAS wild-type status, further study of codon 600 of the BRAF gene could be required.

Expresión inmunohistoquímica de p53 en individuos con liquen / Immunohistochemical expression of p53 in individuals with lichen planus

Objetivo: Estimar el riesgo del potencial de malignización del liquen plano bucal analizando la expresión de la proteína p53. Materiales y metodos: Se realizó un diseño de cohorte de sujetos con diagnostico histopatológico de liquen. El desenlace fue el desarrollo de cáncer si/no. El total de individuos que cumplió con los criterios de inclusión/exclusión fue de 58. A los 58 sujetos se les realizó la determinación de p53. Resultados: Cuarenta y nueve individuos mostraron una expresión de p53 menor al 5% con una P>0,05% intrasujeto no transformado. En los 9 individuos transformados se observaron diferencias significativas entre la determinación pre y post de la proteína p53. El Riesgo Relativo fue de 188 con una significación estadística de P< 0,01. Conclusion: La expresión de la proteína p53 en los individuos con liquen apoya la hipótesis que niveles superiores al 5%constituye un factor de incremento del riesgo en la transformación maligna de esta patología. Nuestros hallazgos deberían ser corroborados en el futuro con mayor número de individuos. La determinación de la p53 mediante IHQ en individuos con liquen plano bucal podría modificar el seguimiento clínico de estos individuos. Esto permitiría un diagnóstico precoz de cualquier alteración que pueda indicar un posible cambio hacia la malignización.

Objective: To determine the risk for potential malignant transformation of oral lichen planus by analyzing protein p53 expression. Materials and methods: Cohort study of subjects with a histopathologic diagnosis of lichen. The study analyzed whether or not subjects developed cancer. A total of 58 subjects fulfilled the inclusion/exclusion criteria, and were analyzed for p53. Results: Fortynine(49) subjects showed a p53 expression <5%, with a p>0.05 among subjects undergoing no transformation. In the 9 subjects undergoing malignant transformation, significant differences were observed between pre and post p53 expression. The relative risk was 188, with a statistical significance of p< 0.01. Conclusions: Protein p53 expression in subjects with lichen supports the hypothesis that levels >5% are associated with an increased risk of malignant transformation of this condition. Should our findings be proved in a larger series in the future, the clinical follow-up of these subjects could be modified. This would allow an early diagnosis of any disorder indicative of a potential malignant transformation.

Variable number tandem repeats in the promoter region of prostacyclin synthase gene in choline deficient rats

Weanling Sprague-Dawley rats were fed on a choline-deficient diet with hydrogenated vegetable oil and corn oil as lipids develop acute renal failure. Pathogenesis of the latter is controversial and an ischemic mechanism has been proposed. Arachidonic acid derivatives are involved in the regulation of vascular tonus. Vasospasm could be due to an increase in tromboxane A2-mediated vasoconstriction or to a decrease in prostacyclin-induced vasodilatation. Enzymes involved in the synthesis of both compounds are tromboxane A2- and prostacyclin-synthase respectively. The aim of this study was to identify the variable number tandem repeats (VNTR) in the promoter region of prostacyclin synthase gene and verify if there exists a relationship between the occurrence of VNTR in those choline-deficient rats which die because of acute renal failure and those which do not. We verified the presence of the VNTR in the prostacyclin synthase rat gene, but we did not find any difference in the molecular weight of the alleles between experimental and control rats. Renal reparation of the acute kidney injury due to choline deficiency in some rats is not related with differences in VNTR in the promoter region of the prostacyclin synthase gene.

Detección de micrometástasis de cáncer de mama en ganglio centinela por biología molecular / Detection of breast cancer micrometastasis in the centinela lymph node by molecular biology

El estudio del ganglio centinela (GC) en cáncer de mama, es una evaluación confiable del estatus axilar. El motivo del presente estudio es evaluar mediante técnicas de biología molecular (BM), la presencia del RNA mensajero de mamaglobina (MAG) A y B, en GC de mama y correlacionar estos hallazgos con las características del tumor mamario, intentando identificar un subgrupo de individuos con mayor riesgo de tener metástasis en ganglios axilares.Fueron estudiadas prospectivamente (junio 2004-agosto 2007) 43 pacientes con cáncer de mama (tumor menor de 3 cm y axila clínicamente negativa). Se realizó citología intraoperatoria, seleccionándose casos con GC negativo, para estudio con hematoxilina-eosina (HE), inmunohistoquímica (IHQ) y BM. Se realizó seguimiento clínico.Con técnicas de rutina se observaron micrometástasis en 3 casos, con IHQ 5 casos (2 de ellos negativos con HE) y con BM 21 casos GC positivo. En conclusión, el agregado de la IHQ y más aún de la BM, aumenta la sensibilidad para la detección de micrometástasis en el GC. No hallamos una relación directa entre los factores de riesgo analizados en los individuos y la expresión de MAG. Podría plantearse la posibilidad de que MAG sea un marcador de pronóstico independiente de los factores de riesgo evaluados

Inmunohistoquímica de la proteína p16INK4a en biopsias y extendidos cervicovaginales y su relación con HPV por PCR / Immunohistochemistry of p16INK4a in biopsies and cervicovaginal smears, and its correlation with HPV detected by PCR

Estudios recientes sugieren que la sobreexpresión de p16, determinada por inmunohistoquímica, sería un marcador específico de células escamosas displásicas y neoplásicas con alta asociación con HPV de alto riesgo. Nuestro objetivo fue correlacionar los hallazgos cito/histológicos con la expresión de p16 y el subtipo de HPV por PCR. Seleccionamos 95 biopsias de cuello uterino y 4 legrados endocervicales de 99 individuos, y 30 extendidos cervicovaginales de otros 30 individuos, que se dividieron según el diagnóstico morfológico. Inmunomarcamos cortes del material incluido en parafina y los extendidos con el kit CINtecT p16INK4a (DAKO). Evaluamos HPV por PCR utilizando 25/99 biopsias con lesión intraepitelial escamosa de bajo grado. Observamos marcación positiva para p16 en 1/35 biopsias (2.9%) y 1/11 extendidos (9%) en los grupos sin HPV ni displasia; 16/25 biopsias (64%) y 6/10 extendidos (60%) en aquellos con lesión de bajo grado y 38/39 biopsias (97.4%) y 8/9 extendidos (89%) en los grupos con lesión de alto grado y carcinoma escamoso. Todas las muestras con HPV-6/11 fueron negativas o positivas focales para p16, en tanto que aquellas con HPV-18 u otros subtipos fueron mayoritariamente positivas de tipo difuso. Concluimos que la expresión de p16 presenta alta correlación con el diagnóstico cito/histológico y alta asociación entre la marcación difusa y la presencia de HPV de alto riesgo, aportando mayor objetividad en casos dudosos y ayudando a seleccionar grupos de individuos con riesgo de progresión de enfermedad, con un costo aceptable para estudiar grandes grupos.

Recent studies suggest that p16 overexpression determined by immunohistochemistry would be a specific marker for neoplastic and dysplastic squamous cells associated with high-risk HPV. The purpose of this study was to assess the correlation between cyto-histological findings, p16 expression and HPV subtype. A total of 99 biopsies were selected, 4 endocervical curettages and 95 uterine cervix biopsies, as well as 30 cervicovaginal smears from other 30 patients. The samples were divided according to the morphological diagnosis. Paraffin-embedded sections and cervicovaginal smears were immunostained using the CINtecT p16INK4a Cytology Kit (DAKO). HPV was analyzed by PCR in 25 of the 99 biopsies with low-grade squamous intraepithelial lesion. Among those patients with neither HPV nor dysplasia, 1 of 35 (2.9%) biopsies and 1 of 11 (9%) smears were positive for p16. Sixteen of 25 (64%) biopsies and 6 of 10 (60%) smears of the low-grade lesion cases, and 38 of 39 (97.4%) biopsies and 8 of 9 (89%) smears of the high-grade lesion and squamous carcinoma were positive for p16. All cases of HPV-6/11 were negative or focally positive for p16. Most cases of HPV-18 or other subtypes were diffusely positive. Our results indicate that p16 expression is highly correlated with cyto-histological diagnosis, and is associated with diffuse staining and high-risk HPV. This technique provides greater objectivity in doubtful cases, and helps select patients at risk of disease progression at an acceptable cost when used in large populations.

La citometría de flujo en el estudio de tumores mediastinales ricos en elementos linfoides / Flow cytometry for the study of mediastinal tumors with abundant lymphoid elements

El mediastino anterior es un sitio frecuente de localización de tumores ricos en elementos linfoides. La identificación correcta de cada entidad es de importancia en el tratamiento de los pacientes. En ocasiones puede plantearse el diagnóstico diferencial entre timoma y linfoma linfoblástico con fenotipo de precursor T (LLB-T). La Citometría de Flujo (CF) es una técnica complementaria útil para estos tumores de la cual se obtiene información cualitativa y cuantitativa. Revisamos 38 tumores mediastinales que tenían estudio de CF. Además comparamos los resultados de CF de timomas y tejido tímico normal con 42 casos de LLB-T de otras localizaciones anatómicas. De los 38 tumores mediastinales 6 eran lesiones benignas, 9 linfomas difusos de células grandes con fenotipo B (LDCG-B), 10 linfomas de Hodgkin (LH), 11 timomas y 2 LLB-T. En 24 casos la CF aportó información positiva, definiendo el inmunofenotipo de las células linfoides neoplásicas, o los linfocitos característicos que acompañan a los timomas. La CF en los 10 casos de LH y en 4 lesiones benignas permitió descartar otros tipos de linfoma (LDCG-B, LLB-T, etc.). Las marcaciones para CD3, CD4 y CD8 fueron las más útiles para el diagnóstico diferencial entre timomas y LLB-T. En conclusión, la CF es una técnica complementaria de utilidad que aporta información en lesiones mediastinales de manera rápida, requiriendo cantidades pequeñas de material, tanto para el diagnóstico inicial como para el monitoreo de estas enfermedades.

The anterior mediastinum is a common site of tumors with abundant lymphoid elements. Flow cytometry is a useful complementary technique to analyze this type of tumors, which provides qualitative and quantitative information. A differential diagnosis can be sometimes made between thymoma and precursor T-lymphoblastic lymphoma (T-LBL). Correct identification is of utmost importance for patient treatment. A total of 38 mediastinal tumors were analyzed, and samples were separated for flow cytometry. Flow cytometry data from thymomas and normal thymic tissue were compared with 42 cases of T-LBL from other anatomical locations. Among 38 mediastinal tumors, we found 6 benign lesions, 9 diffuse large B-cell lymphomas (DLBCL), 10 Hodgkin lymphomas (HL), 11 thymomas and 2 T-LL. Flow cytometry provided positive information in 24 cases, and defined lymphoid neoplastic cells immunophenotype or the typical lymphocytes accompanying thymomas. Flow cytometry helped differentiate 10 cases of HL and 4 benign lesions from other lymphomas (DLBCL, T-LBL, etc.). CD3, CD4 and CD8 expressions were most useful for the differential diagnosis of thymomas and T-LL. To conclude, flow cytometry is a valid complementary technique, which promptly provides information on mediastinal lesions, requiring small quantities of tissue for both early diagnosis and follow up of these diseases.

Estudio del ganglio centinela: diagnostico y tratamiento del melanoma maligno cutaneo, estadios I y II / Study of the sentinel lymph node: diagnosis and treatment of cutaneous malignant melanoma

La sobrevida a cinco años de los casos con melanoma maligno primario localizado es de aproximadamenteun 80%, comparada con un 35% cuando los ganglios están comprometidos. Se estudióel/los ganglio/s centinela/s mediante hematoxilina-eosina (HE), inmunohistoquímica (IHQ) y biología molecular(BM) de individuos con diagnóstico de melanoma maligno estadio I o II. La población se dividió en tres grupos:HE-/IHQ+/BM+: 67% fallecieron; HE-/IHQ-/BM+: 57% fallecieron y HE-/IHQ-/BM-: el 100% de los individuos vivensin linfadenectomía, con una mediana de seguimiento de 60 meses. Los individuos que mostraron negatividadcon los tres métodos tuvieron un índice de recurrencia nulo. Los datos de este estudio sugieren una nuevaestadificación oncológica a nivel molecular que permitiría seleccionar a los individuos que presenten metástasissubmicroscópicas para un tratamiento completo, pero también evitar linfadenectomías en muchos individuos queno tienen metástasis ganglionares, permitiendo que éstos no sufran sobretratamiento.

Survival at 5 years of patients with localized primary malignant melanoma is about80%, compared with a 35% survival in case of lymph nodes involvement. Sentinel lymph node(s) from 45 subjectswith diagnosis of malignant melanoma stage I or II was/were studied with hematoxylin-eosin (HE), immunohistochemistry(IHC) and molecular biology (MB) techniques. The population was divided into three groups:HE-/IHC+/MB+, where 67% patients died; HE-/IHC-/MB+, where 57% died; and HE-/IHC-/MB-, where 100% ofthe patients are alive, with no lymphadenectomy and a median follow-up of 60 months. Those subjects whoshowed negativity with all the three methods had a null recurrence rate. Data herein obtained suggest a newmolecular oncological staging, which would allow the selection of patients with submicroscopic metastases for acomplete treatment. Moreover, several patients with no lymph node metastases should not undergo lymphadenectomies,and overtreatment could therefore be avoided.

Deteccion de micrometastasis de carcinoma de colon en glanglios linfaticos / Detection of micrometastases of colorectal carcinoma in lymph nodes

En el carcinoma colorrectal Ia diseminación a los ganglios linfáticos es un factor pronóstico reco nocido. La presencia de ganglios linfáticos con micrometástasis en muchos casos no puede ser detectada por técnicas rutinarias. Se estudiaron prospectivamente 162 ganglios linfáticos de 30 pacientes con carcinoma de colon, los cuales según los resultados de Ias técnicas rutinarias fueron clasificados como Dukes A (2), Dukes B (19) y Dukes C (9). Un paciente con enfermedad colónica benigna se uso como control negativo. Todos los ganglios se seccionaron en mitades, una de Ias cuales se almacenó en nitrógeno líquido para su ulterior estudio por técnicas de biología molecular, mediante Ia expresión dei antígeno carcinoembrionario (CEA). La otra mitad fue fijada en formaldehído e incluída en parafina para su estudio anatomopatológico e inmunohistoquímico. Dei total de los casos se detectó un aumento dei 50% de Ia sensibilidad en Ia detección de micrometástasis mediante Ia reacción en cadena de Ia polimerasa con transcriptasa reversa (RT PCR) para los Dukes A B y se detectó Ia expresión de dicho antígeno en el total de ]os casos Dukes C. Estos resultados evidencian una mayor sensibilidad en Ia detección de micrometástasis utilizando RT PCR en comparación con Ias técnicas rutinarias, incluyendo Ia inmunohistoquímica.

Infección intrabucal por helicobacter en paciente de sexo masculino / Intraoral infection by helycobacter in a male patient

El Helicobacter Pylori es una bacteria espiralada Gram negativa anaerobia que coloniza la mucosa gástrica. Algunos investigadores sugieren que la cavidad oral es reservorio del Helicobacter pylori, teniendo implicancia en la reinfección. Objetivo. Determinar si el Helicobacter pylori puede ser agente etiológico del ardor lingual y halitosis. Presentación del caso. Paciente varón de 35 años consulta por halitosis y ardor bucal, acompañado de epigastralgia. Presenta hiperplasia de papilas filiformes en dorso lingual con exámen micológico negativo. La biopsia gástrica demostró una gastritis crónica en actividad por Helicobacter pylori. Se realizó la biopsia parcial del área lingual afectada para estudio histopatológico y determinación del Helicobacter pylori con Biología Molecular. Resultados. Histológicamente, la lesión lingual presentaba acantosis, papilomatosis e hiperqueratosis, identificándose con técnica de Giemsa bacterias espiraladas compatibles con Helicobacter pylori adheridas a la superficie de las células epiteliales. La técnica de PCR permitió detectar la presencia del ADN del Helicobacter pylori. Mediante tratamiento antibiótico local se logró la remisión de la sintomatología. Conclusión: Los resultados obtenidos sugieren un rol etiológico para el Helicobacter pylori en esta patología. Creemos necesario ampliar el tamaño de la población con efecto de dilucidar si el Helicobacter pylori está relacionado etiológicamente del ardor lingual y halitosis